Mag Oligo DT Magnetische Beads mRNA Extractie mRNA Zuivering Magnetische Beads Hoge Zuiverheid

Mag Oligo dT mRNA Extractie mRNA Zuivering

Kort Introductie

Oligo dT magnetische kralen zijn magnetische microsferen die covalent zijn gecoat met oligodeoxythymine-strengen op hun oppervlak. Hun kernprincipe maakt gebruik van de base complementaire koppelingsregel, waarbij de Oligo dT-strengen specifiek hybridiseren en binden aan de PolyA-staart, een kenmerkend kenmerk aan het 3'-uiteinde van eukaryotisch messenger RNA (mRNA), waardoor de snelle en hoogzuivere scheiding van mRNA van totaal RNA mogelijk is.

Simpel gezegd, Oligo dT magnetische kralen werken als een "gespecialiseerde magnetische kam", die mRNA met een PolyA-staart precies "extraheert" uit het RNA-mengsel.

Producteigenschappen

Hoge specificiteit: Bindt specifiek aan RNA met een PolyA-staart, voornamelijk mRNA, waardoor interferentie van rRNA en tRNA (die meer dan 95% van het totale RNA vormen) effectief wordt verwijderd.

Hoge zuiverheid en integriteit: Zachte chemische reacties en niet-alcoholische wasmethoden behouden de integriteit en zuiverheid van mRNA beter, waardoor het geschikt is voor downstream-toepassingen die een extreem hoge RNA-kwaliteit vereisen.

Snelle en eenvoudige bediening: Het hele proces kan binnen 30-60 minuten worden voltooid, aanzienlijk sneller dan de traditionele oligo dT cellulosekolomchromatografiemethode, en vereist geen centrifugatie.

Hoge doorvoercompatibiliteit: Gemakkelijk te automatiseren, compatibel met 96-wells plaatformaten, en voldoet aan de eisen van high-throughput toepassingen zoals sequencing.

Hoge gevoeligheid: Geschikt voor mRNA-isolatie uit sporenmonsters (bijv. kleine aantallen cellen, laser capture microdissectie monsters, FFPE-secties).

Veilig en milieuvriendelijk: Vermijdt het gebruik van giftige reagentia zoals fenol en chloroform.

Belangrijkste toepassingsgebieden

Oligo dT magnetische kralen zijn een essentieel hulpmiddel in bijna alle gebieden die mRNA-onderzoek omvatten.

Next-Generation Sequencing (NGS)

RNA-Seq: Dit is de meest kernachtige toepassing. Het verrijken van mRNA met behulp van Oligo dT magnetische kralen voor het construeren van sequencingbibliotheken maakt analyse van genexpressieniveaus, ontdekking van nieuwe transcripten en detectie van alternatieve splicing mogelijk. Voor eukaryoten is dit de meest gebruikelijke methode voor mRNA-bibliotheekvoorbereiding.

Single-Cell RNA Sequencing (scRNA-seq): Op het niveau van één cel zijn Oligo dT magnetische kralen essentieel voor het vastleggen van mRNA dat vrijkomt na cellyse.

cDNA-bibliotheekconstructie en -klonering

Gezuiverd mRNA dient als sjabloon voor het synthetiseren van de eerste streng van cDNA, gebruikt voor het construeren van cDNA-bibliotheken, genklonering en functionele studies.

Genexpressie-analyse

RT-qPCR: Het verrijken van mRNA, gevolgd door reverse transcriptie en kwantitatieve PCR, levert nauwkeurigere en gevoeligere genexpressiegegevens op door achtergrondruis van niet-mRNA te verwijderen.

Northern Blot: Vereist hoogzuiver mRNA als het doelmolecuul voor probing.

In Vitro Vertaling

Gebruikt in celvrije eiwitexpressiesystemen, waarbij het gezuiverde mRNA direct dient als sjabloon voor het synthetiseren van het doelwit-eiwit.

Ziekteonderzoek en -diagnose

Biomarkerontdekking: Het isoleren van mRNA uit klinische monsters (bijv. bloed, tumorweefsel) om te zoeken naar ziekte-geassocieerde genexpressie-handtekeningen.

Pathogeendetectie: Bepaalde virale RNA's bezitten ook PolyA-staarten en kunnen worden verrijkt met behulp van Oligo dT magnetische kralen voor detectie.

Technische info

Samenvatting

Oligo dT magnetische kralen zijn een efficiënt en betrouwbaar hulpmiddel voor mRNA-zuivering. Bekend om hun uitzonderlijke specificiteit, eenvoudige en snelle werking en uitstekende compatibiliteit, zijn ze een onmisbaar onderdeel geworden in modern moleculair biologisch, genomisch en transcriptomisch onderzoek, met name in high-throughput RNA-sequencing. Hun belang zal nog prominenter worden met de vooruitgang van precisiegeneeskunde en single-cell technologieën.