Mag Oligo DT 磁気ビーズ mRNA抽出 mRNA精製 磁気ビーズ 高純度

Mag Oligo dT mRNA抽出 mRNA精製

概要はじめに

Oligo dT磁気ビーズは、表面にオリゴデオキシチミジン鎖を共有結合させた磁性マイクロビーズです。その原理は、塩基相補性対合規則を利用しており、Oligo dT鎖が特異的にハイブリダイズし、PolyAテールに結合します。これは真核生物のメッセンジャーRNA（mRNA）の3'末端の特徴であり、全RNAからのmRNAの迅速かつ高純度な分離を可能にします。

簡単に言うと、Oligo dT磁気ビーズは「特殊な磁気櫛」のように機能し、PolyAテールを持つmRNAをRNA混合物から正確に「抽出」します。

製品の特徴

高い特異性：PolyAテールを持つRNA、主にmRNAに特異的に結合し、rRNAやtRNA（全RNAの95％以上を占める）からの干渉を効果的に除去します。

高い純度と完全性：穏やかな化学反応と非アルコール洗浄方法により、mRNAの完全性と純度がより良く保たれ、非常に高いRNA品質を必要とする下流アプリケーションに適しています。

迅速かつ簡単な操作：全プロセスを30〜60分以内に完了でき、従来のoligo dTセルロースカラムクロマトグラフィー法よりも大幅に高速で、遠心分離も必要ありません。

ハイスループット互換性：容易に自動化でき、96ウェルプレート形式に対応しており、シーケンスなどのハイスループットアプリケーションの要求を満たします。

高感度：微量サンプル（例：少数の細胞、レーザーキャプチャマイクロダイセクションサンプル、FFPE切片）からのmRNA分離に適しています。

安全で環境に優しい：フェノールやクロロホルムなどの有毒試薬の使用を回避します。

主な応用分野

Oligo dT磁気ビーズは、mRNA研究に関わるほぼすべての分野で不可欠なツールです。

次世代シーケンス（NGS）

RNA-Seq：これは最も重要なアプリケーションです。Oligo dT磁気ビーズを使用してmRNAを濃縮し、シーケンスライブラリーを構築することで、遺伝子発現レベルの分析、新規転写産物の発見、および代替スプライシングの検出が可能になります。真核生物の場合、これはmRNAライブラリー調製の最も一般的な方法です。

シングルセルRNAシーケンス（scRNA-seq）：シングルセルレベルでは、Oligo dT磁気ビーズは、細胞溶解後に放出されたmRNAを捕捉するための鍵となります。

cDNAライブラリーの構築とクローニング

精製されたmRNAは、cDNAの最初の鎖を合成するためのテンプレートとして機能し、cDNAライブラリーの構築、遺伝子クローニング、および機能研究に使用されます。

遺伝子発現解析

RT-qPCR：mRNAを濃縮し、逆転写と定量的PCRを行うことで、非mRNAバックグラウンドノイズを除去し、より正確で感度の高い遺伝子発現データが得られます。

ノーザンブロット：プロービングのターゲット分子として高純度のmRNAが必要です。

in vitro翻訳

無細胞タンパク質発現システムで使用され、精製されたmRNAが直接ターゲットタンパク質の合成のためのテンプレートとして機能します。

疾患研究と診断

バイオマーカーの発見：臨床サンプル（例：血液、腫瘍組織）からmRNAを分離し、疾患関連の遺伝子発現シグネチャを検索します。

病原体検出：特定のウイルスRNAもPolyAテールを持っており、Oligo dT磁気ビーズを使用して検出のために濃縮できます。

技術情報

Oligo dT磁気ビーズは、mRNA精製のための効率的で信頼性の高いツールです。その卓越した特異性、簡単で迅速な操作、および優れた互換性で知られており、現代の分子生物学、ゲノミクス、およびトランスクリプトミクス研究、特にハイスループットRNAシーケンスにおいて不可欠なコンポーネントとなっています。精密医療とシングルセル技術の進歩に伴い、その重要性はさらに高まるでしょう。