خرز مغناطيسي Mag Oligo DT لاستخلاص الحمض النووي الريبوزي الرسول وتنقيته، خرز مغناطيسي، نقاوة عالية

ماج أوليجو dT مرنا استخراج مرنا تنقية

مختصرمقدمة

الخرز المغناطيسي Oligo dT عبارة عن كريات مجهرية مغناطيسية مطلية تساهميًا بخيوط oligodeoxythymine على سطحها. يستخدم مبدأهم الأساسيقاعدة الاقتران التكميلية الأساسية، حيث يتم تهجين خيوط Oligo dT بشكل خاص والارتباط بهاذيل بوليا، وهي سمة مميزة في الطرف 3' من الحمض النووي الريبوزي الرسول حقيقي النواة (mRNA)، مما يتيح فصل سريع وعالي النقاء للحمض النووي الريبي المرسال من الحمض النووي الريبي الكلي.

ببساطة، تعمل الخرز المغناطيسي Oligo dT مثل "مشط مغناطيسي متخصص"، حيث "تستخرج" mRNA بدقة مع ذيل PolyA من خليط RNA.

ميزات المنتج

خصوصية عالية:يرتبط على وجه التحديد بالـ RNA بذيل PolyA، في المقام الأول mRNA، مما يزيل بشكل فعال التداخل من rRNA وtRNA (الذي يشكل أكثر من 95٪ من إجمالي RNA).

درجة نقاء ونزاهة عالية:التفاعلات الكيميائية اللطيفة وطرق الغسيل غير الكحولية تحافظ بشكل أفضل على سلامة ونقاء mRNA، مما يجعلها مناسبة للتطبيقات النهائية التي تتطلب جودة RNA عالية للغاية.

عملية سريعة وبسيطة:يمكن إكمال العملية بأكملها في غضون 30 إلى 60 دقيقة، وهي أسرع بكثير من طريقة التحليل اللوني لعمود السليلوز التقليدية بنسبة oligo dT، ولا تتطلب أي طرد مركزي.

التوافق عالي الإنتاجية:يمكن تشغيله تلقائيًا بسهولة، ومتوافق مع تنسيقات اللوحات ذات 96 بئرًا، مما يلبي متطلبات التطبيقات عالية الإنتاجية مثل التسلسل.

حساسية عالية:مناسبة لعزل mRNA من العينات النزرة (على سبيل المثال، أعداد صغيرة من الخلايا، وعينات التقاط الليزر الدقيقة، وأقسام FFPE).

آمنة وصديقة للبيئة:يتجنب استخدام الكواشف السامة مثل الفينول والكلوروفورم.

مجالات التطبيق الرئيسية

تُعد الخرز المغناطيسي Oligo dT أداة أساسية في جميع المجالات التي تتضمن أبحاث mRNA تقريبًا.

تسلسل الجيل التالي (NGS)

تسلسل الحمض النووي الريبي:هذا هو التطبيق الأكثر الأساسية. إن إثراء mRNA باستخدام الخرز المغناطيسي Oligo dT لبناء مكتبة التسلسل يسمح بتحليل مستويات التعبير الجيني، واكتشاف النصوص الجديدة، والكشف عن الربط البديل. بالنسبة لحقيقيات النوى، هذه هي الطريقة الأكثر شيوعًا لإعداد مكتبة mRNA.

تسلسل الحمض النووي الريبي (RNA) أحادي الخلية (scRNA-seq):على مستوى الخلية الواحدة، تعد الخرزات المغناطيسية Oligo dT هي المفتاح لالتقاط الرنا المرسال الذي تم إطلاقه بعد تحلل الخلية.

بناء مكتبة [كدنا] والاستنساخ

يعمل mRNA المنقى كقالب لتجميع الشريط الأول من cDNA، المستخدم لبناء مكتبات cDNA، واستنساخ الجينات، والدراسات الوظيفية.

تحليل التعبير الجيني

الرايت-قبكر:يؤدي إثراء mRNA متبوعًا بالنسخ العكسي وPCR الكمي إلى الحصول على بيانات تعبير جيني أكثر دقة وحساسية عن طريق إزالة ضوضاء الخلفية غير mRNA.

اللطخة الشمالية:يتطلب mRNA عالي النقاء باعتباره الجزيء المستهدف للتحقيق.

الترجمة في المختبر

يستخدم في أنظمة التعبير البروتيني الخالية من الخلايا، حيث يعمل mRNA المنقى مباشرة كقالب لتركيب البروتين المستهدف.

أبحاث وتشخيص الأمراض

اكتشاف العلامات الحيوية:عزل mRNA من العينات السريرية (مثل الدم وأنسجة الورم) للبحث عن توقيعات التعبير الجيني المرتبطة بالمرض.

الكشف عن مسببات الأمراض:تمتلك بعض RNAs الفيروسية أيضًا ذيول PolyA ويمكن إثراؤها باستخدام خرز Oligo dT المغناطيسي للكشف.

معلومات فنية

ملخص

تعتبر الخرز المغناطيسي Oligo dT أداة فعالة وموثوقة لتنقية mRNA. تشتهر بخصوصيتها الاستثنائية، وتشغيلها البسيط والسريع، والتوافق الممتاز، وقد أصبحت عنصرًا لا غنى عنه في أبحاث البيولوجيا الجزيئية الحديثة، وعلم الجينوم، وعلم النسخ، لا سيما في تسلسل الحمض النووي الريبي (RNA) عالي الإنتاجية. وستصبح أهميتها أكثر وضوحًا مع تقدم الطب الدقيق وتقنيات الخلية الواحدة.