Mag Oligo DT Magnetkügelchen mRNA-Extraktion mRNA-Reinigung Magnetkügelchen Hohe Reinheit

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Kurz Einführung

Oligo dT Magnetkügelchen sind magnetische Mikrosphären, die kovalent mit Oligodesoxythymin-Strängen auf ihrer Oberfläche beschichtet sind. Ihr Kernprinzip nutzt die Basenkomplementaritätsregel, wobei die Oligo dT-Stränge spezifisch hybridisieren und an den PolyA-Schwanz binden, ein charakteristisches Merkmal am 3'-Ende der eukaryotischen Messenger-RNA (mRNA), was die schnelle und hochreine Trennung von mRNA aus Gesamt-RNA ermöglicht.

Einfach ausgedrückt, wirken Oligo dT Magnetkügelchen wie ein "spezieller magnetischer Kamm", der mRNA mit einem PolyA-Schwanz präzise "extrahiert" aus der RNA-Mischung.

Produktmerkmale

Hohe Spezifität: Bindet spezifisch an RNA mit einem PolyA-Schwanz, hauptsächlich mRNA, und entfernt effektiv Störungen durch rRNA und tRNA (die über 95 % der Gesamt-RNA ausmachen).

Hohe Reinheit und Integrität: Sanfte chemische Reaktionen und nicht-alkoholische Waschmethoden erhalten die Integrität und Reinheit der mRNA besser, wodurch sie für nachgeschaltete Anwendungen geeignet ist, die eine extrem hohe RNA-Qualität erfordern.

Schnelle und einfache Bedienung: Der gesamte Prozess kann innerhalb von 30-60 Minuten abgeschlossen werden, was deutlich schneller ist als die traditionelle Oligo dT-Zellulose-Säulenchromatographie-Methode und keine Zentrifugation erfordert.

High-Throughput-Kompatibilität: Einfach zu automatisieren, kompatibel mit 96-Well-Plattenformaten, um den Anforderungen von High-Throughput-Anwendungen wie dem Sequencing gerecht zu werden.

Hohe Sensitivität: Geeignet für die mRNA-Isolierung aus Spurenproben (z. B. kleine Zellzahlen, laserdissektierte Proben, FFPE-Schnitte).

Sicher und umweltfreundlich: Vermeidet die Verwendung von toxischen Reagenzien wie Phenol und Chloroform.

Hauptanwendungsbereiche

Oligo dT Magnetkügelchen sind ein wesentliches Werkzeug in fast allen Bereichen, die mRNA-Forschung beinhalten.

Next-Generation Sequencing (NGS)

RNA-Seq: Dies ist die wichtigste Anwendung. Die Anreicherung von mRNA mit Oligo dT Magnetkügelchen für den Aufbau von Sequenzierungsbibliotheken ermöglicht die Analyse der Genexpressionsniveaus, die Entdeckung neuer Transkripte und die Erkennung von alternativem Splicing. Für Eukaryoten ist dies die gebräuchlichste Methode zur mRNA-Bibliotheksvorbereitung.

Einzelzell-RNA-Sequenzierung (scRNA-seq): Auf Einzelzellebene sind Oligo dT Magnetkügelchen der Schlüssel zur Erfassung von mRNA, die nach der Zelllyse freigesetzt wird.

cDNA-Bibliothekskonstruktion und Klonierung

Gereinigte mRNA dient als Vorlage für die Synthese des ersten cDNA-Strangs, der für den Aufbau von cDNA-Bibliotheken, Genklonierung und Funktionsstudien verwendet wird.

Genexpressionsanalyse

RT-qPCR: Die Anreicherung von mRNA, gefolgt von reverser Transkription und quantitativer PCR, liefert genauere und sensitivere Genexpressionsdaten, indem Hintergrundrauschen ohne mRNA entfernt wird.

Northern Blot: Benötigt hochreine mRNA als Zielmolekül für die Sondierung.

In-vitro-Translation

Wird in zellfreien Proteinexpressionssystemen verwendet, wobei die gereinigte mRNA direkt als Vorlage für die Synthese des Zielproteins dient.

Krankheitsforschung und -diagnose

Biomarker-Entdeckung: Isolierung von mRNA aus klinischen Proben (z. B. Blut, Tumorgewebe), um nach krankheitsassoziierten Genexpressionssignaturen zu suchen.

Pathogennachweis: Bestimmte virale RNAs besitzen ebenfalls PolyA-Schwänze und können mit Oligo dT Magnetkügelchen zur Detektion angereichert werden.

Technische Informationen

Oligo dT Magnetkügelchen sind ein effizientes und zuverlässiges Werkzeug zur mRNA-Reinigung. Bekannt für ihre außergewöhnliche Spezifität, einfache und schnelle Bedienung und hervorragende Kompatibilität, sind sie zu einem unverzichtbaren Bestandteil in der modernen Molekularbiologie, Genomik und Transkriptomik-Forschung geworden, insbesondere im High-Throughput-RNA-Sequencing. Ihre Bedeutung wird mit dem Fortschritt der Präzisionsmedizin und der Einzelzelltechnologien noch deutlicher werden.