Oligo dT Magnetische kralen voor mRNA-zuivering

Mag Oligo dT mRNA extractie mRNA-zuivering

KortInleiding

Oligo dT magnetische kralen zijn magnetische microsferen die covalent zijn bekleed met oligodeoxythymine strengen op hun oppervlak.basiscompleterende koppeling regel, waarbij de Oligo dT-strengen specifiek hybriden en zich aan dePolyA staart, een kenmerkend kenmerk aan het 3'-einde van eukaryotisch boodschapper RNA (mRNA), dat de snelle en hoogzuivere scheiding van mRNA van totaal RNA mogelijk maakt.

Simpel gezegd, Oligo dT magnetische kralen werken als een "gespecialiseerde magnetische kam", precies "extraheren" mRNA met een PolyA staart uit het RNA-mengsel.

Productkenmerken

Hoge specificiteit:Bindt specifiek aan RNA met een PolyA-staart, voornamelijk mRNA, waardoor interferentie van rRNA en tRNA (die meer dan 95% van het totale RNA uitmaken) effectief wordt verwijderd.

Hoge zuiverheid en integriteit:Een zachte chemische reactie en een alcoholvrije wasmethode zorgen ervoor dat de integriteit en de zuiverheid van mRNA beter behouden blijven, waardoor het geschikt is voor toepassingen die een extreem hoge RNA-kwaliteit vereisen.

Snelle en eenvoudige werking:Het gehele proces kan binnen 30-60 minuten worden voltooid, aanzienlijk sneller dan de traditionele oligo dT cellulose kolom chromatografie methode, en vereist geen centrifugatie.

Compatibiliteit met hoge doorvoer:Makkelijk geautomatiseerd, compatibel met 96-put platenformaten, die voldoen aan de eisen van hoge doorvoertoepassingen zoals sequencing.

Hoge gevoeligheid:Geschikt voor het isoleren van mRNA uit sporenmonsters (bijv. kleine aantallen cellen, laseropname van microdissecteerde monsters, FFPE-secties).

Veilig en milieuvriendelijk:Vermijd het gebruik van giftige reagentia zoals fenol en chloroform.

Belangrijkste toepassingsgebieden

Oligo dT magnetische kralen zijn een essentieel hulpmiddel op bijna alle gebieden van mRNA-onderzoek.

Next-generation sequencing (NGS)

RNA-Seq:Het verrijken van mRNA met behulp van Oligo dT magnetische kralen voor het sequenceren bibliotheek constructie maakt voor de analyse van gen-expressie niveaus, de ontdekking van nieuwe transcripten,en detectie van alternatieve splitsingVoor eukaryoten is dit de meest voorkomende methode voor de voorbereiding van een mRNA-bibliotheek.

Eencellig RNA-sequencing (scRNA-seq):Op enkelcelniveau zijn Oligo dT magnetische kralen de sleutel voor het vangen van mRNA dat na cellysis wordt vrijgegeven.

cDNA-bibliotheekconstructie en -kloning

Gezuiverd mRNA dient als sjabloon voor de synthese van de eerste cDNA-streng, die wordt gebruikt voor het bouwen van cDNA-bibliotheken, genkloning en functionele studies.

Genexpressie-analyse

RT-qPCR:Het verrijken van mRNA gevolgd door omgekeerde transcriptie en kwantitatieve PCR levert nauwkeurigere en gevoeligere genexpressiegegevens op door niet-mRNA achtergrondgeluid te verwijderen.

Noordelijke Blot:Vereist mRNA van hoge zuiverheid als doelmolecuul.

In Vitro Vertaling

Gebruikt in celvrije eiwitexpressie systemen, waarbij het gezuiverde mRNA rechtstreeks dient als de sjabloon voor de synthese van het doel eiwit.

Ziekteonderzoek en diagnose

Biomarker ontdekking:Het isoleren van mRNA uit klinische monsters (bv. bloed, tumorweefsel) om te zoeken naar ziekte-gerelateerde genexpressie signaturen.

Detectie van pathogenen:Bepaalde virale RNA's bezitten ook PolyA staarten en kunnen worden verrijkt met behulp van Oligo dT magnetische kralen voor detectie.

Technische informatie

Samenvatting

Oligo dT magnetische kralen zijn een efficiënt en betrouwbaar hulpmiddel voor mRNA-zuivering.Ze zijn een onmisbaar onderdeel geworden van de moderne moleculaire biologie., genomica en transcriptomica onderzoek, met name in high-throughput RNA-sequencing.Hun belang zal nog groter worden met de vooruitgang van de precisiegeneeskunde en de technologie van de eencellige geneeskunde.