Магнитные бусины Mag Oligo DT для выделения мРНК, очистки мРНК, магнитные бусины, высокая чистота

Mag Oligo dT mRNA Extraction mRNA Purifcation

Краткое описаниеВведение

Магнитные бусины Oligo dT представляют собой магнитные микросферы, ковалентно покрытые олигодезокситимидиновыми цепями на своей поверхности. Их основной принцип использует правило комплементарного спаривания оснований, где цепи Oligo dT специфически гибридизуются и связываются с PolyA хвостом, характерной особенностью на 3'-конце эукариотической мРНК (mRNA), что позволяет быстро и с высокой степенью очистки отделять мРНК от общей РНК.

Проще говоря, магнитные бусины Oligo dT действуют как «специализированная магнитная расческа», точно «извлекая» мРНК с PolyA хвостом из смеси РНК.

Особенности продукта

Высокая специфичность: Специфически связывается с РНК с PolyA хвостом, в основном с мРНК, эффективно устраняя помехи от рРНК и тРНК (которые составляют более 95% от общей РНК).

Высокая чистота и целостность: Мягкие химические реакции и методы промывки без использования спирта лучше сохраняют целостность и чистоту мРНК, что делает ее пригодной для последующих применений, требующих чрезвычайно высокого качества РНК.

Быстрая и простая работа: Весь процесс может быть завершен в течение 30-60 минут, что значительно быстрее, чем традиционный метод хроматографии на колонке с олиго dT целлюлозой, и не требует центрифугирования.

Высокая пропускная способность: Легко автоматизируется, совместим с форматами 96-луночных планшетов, удовлетворяя потребности высокопроизводительных приложений, таких как секвенирование.

Высокая чувствительность: Подходит для выделения мРНК из следовых образцов (например, небольшое количество клеток, образцы, микродиссектированные лазером, срезы FFPE).

Безопасный и экологически чистый: Избегает использования токсичных реагентов, таких как фенол и хлороформ.

Основные области применения

Магнитные бусины Oligo dT являются важным инструментом практически во всех областях, связанных с исследованиями мРНК.

Секвенирование нового поколения (NGS)

RNA-Seq: Это наиболее важное применение. Обогащение мРНК с использованием магнитных бусин Oligo dT для построения библиотеки секвенирования позволяет анализировать уровни экспрессии генов, обнаруживать новые транскрипты и обнаруживать альтернативный сплайсинг. Для эукариот это наиболее распространенный метод подготовки библиотеки мРНК.

Одноклеточное секвенирование РНК (scRNA-seq): На уровне одной клетки магнитные бусины Oligo dT являются ключом к захвату мРНК, высвобождаемой после лизиса клеток.

Построение и клонирование библиотеки кДНК

Очищенная мРНК служит шаблоном для синтеза первой цепи кДНК, используемой для построения библиотек кДНК, клонирования генов и функциональных исследований.

Анализ экспрессии генов

ОТ-кПЦР: Обогащение мРНК с последующей обратной транскрипцией и количественной ПЦР дает более точные и чувствительные данные об экспрессии генов, удаляя фоновый шум, не связанный с мРНК.

Northern Blot: Требует мРНК высокой чистоты в качестве целевой молекулы для зондирования.

Внутриклеточный перевод

Используется в системах бесклеточной экспрессии белков, где очищенная мРНК непосредственно служит шаблоном для синтеза целевого белка.

Исследования и диагностика заболеваний

Обнаружение биомаркеров: Выделение мРНК из клинических образцов (например, крови, ткани опухоли) для поиска сигнатур экспрессии генов, связанных с заболеваниями.

Обнаружение патогенов: Некоторые вирусные РНК также обладают PolyA хвостами и могут быть обогащены с использованием магнитных бусин Oligo dT для обнаружения.

Техническая информация

Магнитные бусины Oligo dT являются эффективным и надежным инструментом для очистки мРНК. Известные своей исключительной специфичностью, простой и быстрой работой и отличной совместимостью, они стали незаменимым компонентом в современных исследованиях молекулярной биологии, геномики и транскриптомики, особенно в высокопроизводительном секвенировании РНК. Их важность станет еще более заметной с развитием прецизионной медицины и одноклеточных технологий.