ลูกปัดแม่เหล็ก Oligo dT สำหรับการทำให้บริสุทธิ์ mRNA

แม็ก โอลิโก ดีที การสกัด mRNA การทำให้บริสุทธิ์ของ mRNA

สรุป บทนำ

โอลิโก ดีที แมกเนติก บีดส์ คือ ไมโครสเฟียร์แม่เหล็กที่เคลือบด้วยสายโอลิโกดีออกซีไทมีนบนพื้นผิว หลักการทำงานอาศัย กฎการจับคู่เบสแบบสมบูรณ์ โดยสายโอลิโก ดีที จะไฮบริดและจับกับ หางโพลีเอ ซึ่งเป็นลักษณะเฉพาะที่ปลาย 3' ของ mRNA ของยูคาริโอต ทำให้สามารถแยก mRNA ออกจาก RNA ทั้งหมดได้อย่างรวดเร็วและมีความบริสุทธิ์สูง

กล่าวโดยง่าย โอลิโก ดีที แมกเนติก บีดส์ ทำหน้าที่เหมือน "หวีแม่เหล็กพิเศษ" ที่ "สกัด" mRNA ที่มีหางโพลีเอ ออกจากส่วนผสมของ RNA ได้อย่างแม่นยำ

คุณสมบัติผลิตภัณฑ์

ความจำเพาะสูง: จับกับ RNA ที่มีหางโพลีเอ โดยเฉพาะ mRNA เป็นหลัก ช่วยกำจัดสิ่งรบกวนจาก rRNA และ tRNA (ซึ่งคิดเป็นกว่า 95% ของ RNA ทั้งหมด) ได้อย่างมีประสิทธิภาพ

ความบริสุทธิ์และความสมบูรณ์สูง: ปฏิกิริยาเคมีที่อ่อนโยนและวิธีการล้างแบบไม่ใช้แอลกอฮอล์ ช่วยรักษาความสมบูรณ์และความบริสุทธิ์ของ mRNA ได้ดียิ่งขึ้น ทำให้เหมาะสำหรับการใช้งานต่อเนื่องที่ต้องการคุณภาพ RNA สูงมาก

การทำงานที่รวดเร็วและง่าย: กระบวนการทั้งหมดสามารถเสร็จสิ้นได้ภายใน 30-60 นาที ซึ่งเร็วกว่าวิธีโครมาโทกราฟีแบบคอลัมน์โอลิโก ดีที เซลลูโลสแบบดั้งเดิมอย่างมาก และไม่ต้องใช้การปั่นเหวี่ยง

ความเข้ากันได้กับปริมาณงานสูง: สามารถทำงานอัตโนมัติได้ง่าย เข้ากันได้กับรูปแบบเพลท 96 หลุม ตอบสนองความต้องการของการใช้งานปริมาณงานสูง เช่น การจัดลำดับ

ความไวสูง: เหมาะสำหรับการแยก mRNA จากตัวอย่างปริมาณน้อย (เช่น เซลล์จำนวนน้อย ตัวอย่างที่ได้จากการตัดด้วยเลเซอร์ หรือส่วน FFPE)

ปลอดภัยและเป็นมิตรต่อสิ่งแวดล้อม: หลีกเลี่ยงการใช้สารเคมีที่เป็นพิษ เช่น ฟีนอลและคลอโรฟอร์ม

สาขาการใช้งานหลัก

โอลิโก ดีที แมกเนติก บีดส์ เป็นเครื่องมือที่จำเป็นในเกือบทุกสาขาที่เกี่ยวข้องกับการวิจัย mRNA

การจัดลำดับรุ่นต่อไป (NGS)

RNA-Seq: นี่คือการใช้งานหลักที่สุด การเสริม mRNA ด้วยโอลิโก ดีที แมกเนติก บีดส์ สำหรับการสร้างไลบรารีการจัดลำดับ ช่วยให้สามารถวิเคราะห์ระดับการแสดงออกของยีน ค้นพบทรานสคริปต์ใหม่ และตรวจจับการตัดต่อสไปรซิ่งแบบสลับ สำหรับยูคาริโอต นี่เป็นวิธีที่นิยมที่สุดในการเตรียมไลบรารี mRNA

การจัดลำดับ RNA ระดับเซลล์เดี่ยว (scRNA-seq): ในระดับเซลล์เดี่ยว โอลิโก ดีที แมกเนติก บีดส์ เป็นกุญแจสำคัญในการจับ mRNA ที่ปล่อยออกมาหลังจากการสลายเซลล์

การสร้างไลบรารี cDNA และการโคลน

mRNA ที่ทำให้บริสุทธิ์ทำหน้าที่เป็นแม่แบบสำหรับการสังเคราะห์สายแรกของ cDNA ซึ่งใช้สำหรับการสร้างไลบรารี cDNA การโคลนยีน และการศึกษาการทำงาน

การวิเคราะห์การแสดงออกของยีน

RT-qPCR: การเสริม mRNA ตามด้วยการถอดรหัสย้อนกลับและ PCR เชิงปริมาณ ให้ข้อมูลการแสดงออกของยีนที่แม่นยำและไวมากขึ้น โดยการกำจัดสัญญาณรบกวนที่ไม่ใช่ mRNA

Northern Blot: ต้องการ mRNA ที่มีความบริสุทธิ์สูงเป็นโมเลกุลเป้าหมายสำหรับการโพรบ

การแปลในหลอดทดลอง

ใช้ในระบบการแสดงออกโปรตีนแบบไร้เซลล์ โดย mRNA ที่ทำให้บริสุทธิ์ทำหน้าที่เป็นแม่แบบโดยตรงสำหรับการสังเคราะห์โปรตีนเป้าหมาย

การวิจัยและวินิจฉัยโรค

การค้นหาตัวบ่งชี้ทางชีวภาพ: การแยก mRNA จากตัวอย่างทางคลินิก (เช่น เลือด เนื้อเยื่อเนื้องอก) เพื่อค้นหารูปแบบการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับโรค

การตรวจจับเชื้อโรค: RNA ของไวรัสบางชนิดก็มีหางโพลีเอ และสามารถเสริมด้วยโอลิโก ดีที แมกเนติก บีดส์ เพื่อการตรวจจับได้

ข้อมูลทางเทคนิค

โอลิโก ดีที แมกเนติก บีดส์ เป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพและเชื่อถือได้สำหรับการทำให้บริสุทธิ์ของ mRNA ด้วยความจำเพาะที่ยอดเยี่ยม การทำงานที่ง่ายและรวดเร็ว และความเข้ากันได้ที่ดีเยี่ยม ทำให้กลายเป็นส่วนประกอบที่ขาดไม่ได้ในการวิจัยชีววิทยาโมเลกุล จีโนมิกส์ และทรานสคริปโตมิกส์สมัยใหม่ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการจัดลำดับ RNA ปริมาณงานสูง ความสำคัญของมันจะยิ่งเด่นชัดขึ้นด้วยความก้าวหน้าของเวชศาสตร์แม่นยำและเทคโนโลยีระดับเซลล์เดี่ยว