Perlas magnéticas Oligo dT para purificación de ARNm

Mag Oligo dT extracción de ARNm Purificación de ARNm

ResumenIntroducción

Las perlas magnéticas Oligo dT son microesferas magnéticas recubiertas covalentemente con hebras de oligodeoxitimina en su superficie.regla de emparejamiento complementario base, donde las hebras de Oligo dT se hibridan específicamente y se unen a laCuello de poliA, un rasgo característico en el extremo 3' del ARN mensajero eucariótico (ARNm), que permite la separación rápida y de alta pureza del ARNm del ARN total.

En pocas palabras, las perlas magnéticas Oligo dT actúan como un "peine magnético especializado", "extrayendo" precisamente el ARNm con una cola de PolyA de la mezcla de ARN.

Características del producto

Alta especificidad:Se une específicamente al ARN con una cola de PolyA, principalmente ARNm, eliminando eficazmente la interferencia del ARNr y del ARNt (que constituyen más del 95% del ARN total).

Alta pureza e integridad:Las reacciones químicas suaves y los métodos de lavado sin alcohol preservan mejor la integridad y pureza del ARNm, por lo que es adecuado para aplicaciones aguas abajo que requieren una calidad de ARN extremadamente alta.

Operación rápida y sencilla:Todo el proceso puede completarse en 30-60 minutos, significativamente más rápido que el método tradicional de cromatografía de columna de celulosa de oligo dT, y no requiere centrifugado.

Compatibilidad de alto rendimiento:Fácilmente automatizado, compatible con formatos de placas de 96 pozos, satisfaciendo las demandas de aplicaciones de alto rendimiento como la secuenciación.

Alta sensibilidad:Es adecuado para el aislamiento de ARNm de muestras de rastro (por ejemplo, un pequeño número de células, muestras microdisectables de captura láser, secciones de FFPE).

Seguridad y protección del medio ambiente:Evita el uso de reactivos tóxicos como el fenol y el cloroformo.

Principales campos de aplicación

Las perlas magnéticas Oligo dT son una herramienta esencial en casi todos los campos que involucran la investigación de ARNm.

Secuenciación de próxima generación (NGS)

El ADN-Seq:El enriquecimiento de ARNm utilizando perlas magnéticas Oligo dT para la construcción de bibliotecas de secuenciación permite el análisis de los niveles de expresión génica, el descubrimiento de nuevas transcripciones,y detección de empalme alternativoPara los eucariotas, este es el método más común para la preparación de la biblioteca de ARNm.

Secuenciación de ARN unicelular (scRNA-seq):A nivel de célula única, las perlas magnéticas Oligo dT son clave para capturar el ARNm liberado después de la lisis celular.

Construcción y clonación de bibliotecas de cDNA

El ARNm purificado sirve como plantilla para sintetizar la primera hebra de ADNc, utilizada para construir bibliotecas de ADNc, clonación de genes y estudios funcionales.

Análisis de la expresión génica

RT-qPCR:El enriquecimiento del ARNm seguido de la transcripción inversa y la PCR cuantitativa produce datos de expresión génica más precisos y sensibles al eliminar el ruido de fondo no ARNm.

Mancha del norte:Requiere mRNA de alta pureza como la molécula objetivo para la sonda.

Traducción in vitro

Se utiliza en sistemas de expresión de proteínas libres de células, donde el ARNm purificado sirve directamente como plantilla para sintetizar la proteína diana.

Investigación y diagnóstico de enfermedades

Descubrimiento de biomarcadores:Aislar ARNm de muestras clínicas (por ejemplo, sangre, tejido tumoral) para buscar firmas de expresión génica asociadas a la enfermedad.

Detección de patógenos:Ciertos ARN virales también poseen colas PolyA y pueden enriquecerse utilizando perlas magnéticas Oligo dT para su detección.

Información técnica

Resumen de las actividades

Las perlas magnéticas Oligo dT son una herramienta eficiente y confiable para la purificación de ARNm.Se han convertido en un componente indispensable en la biología molecular moderna., genómica y transcriptómica, particularmente en la secuenciación de ARN de alto rendimiento.Su importancia se hará aún más evidente con el avance de la medicina de precisión y las tecnologías de célula única.