NHS magnetische kralen

NHS magnetische kralen zijn microbolletjes gemodificeerd met N-Hydroxysuccinimide (NHS). De NHS-groepen kunnen reageren met aminobevattende biomoleculen (vooral primaire aminen), zoals eiwitten, antilichamen, enzymen, polypeptiden en nucleïnezuren, om stabiele peptidebindingen te vormen en covalente koppeling te bereiken. Ze worden veel gebruikt bij affiniteitszuivering en bij de analytische detectie van antilichamen, antigenen en andere biomoleculen.

1. Eenvoudige bediening: Geen pre-activatie vereist; in staat tot directe covalente koppeling met biologische liganden.
2. Hoge efficiëntie: De koppelingsefficiëntie en bindingscapaciteit van biologische liganden zijn veel hoger dan die van magnetische carboxylkorrels.
3. Snelle reactie: Koppeling van verschillende primaire aminehoudende biomoleculaire liganden kan binnen 1 à 2 uur worden voltooid.
4. Milde omstandigheden: Koppeling kan worden uitgevoerd bij kamertemperatuur of 4℃, met een toepasbaar pH-bereik van 4~10 voor het reactiesysteem.
5. Hoge stabiliteit: Vormt stabiele bindingen om ligandverlies te voorkomen.

Dit product kan alle primaire aminegroepen bevattende stoffen zoals eiwitten, antilichamen en nucleïnezuren covalent koppelen. Het wordt veel toegepast bij de scheiding en zuivering van eiwitten/antilichamen, evenals bij immunoassay-gerelateerde experimentele technieken.

Werkstroom

Koppelingstest van anti-AFM1 monoklonaal antilichaam met NHS magnetische korrels (gekwantificeerd door Bradford-eiwittest)

1. Koppelingstest van monoklonaal antilichaam AFM1 met NHS magnetische kralen (bepaald door Bradford Protein Quantification Assay)

   AFM1 monoklonale antilichaamdosering (μg)	Koppelingsbedrag (μg)	Koppelingsefficiëntie (%)
   5.00 uur	4.67	93.40
   10.00 uur	9.54	95.40
   20.00 uur	19.27	96.35
   30.00 uur	27.32	91.07
   40.00 uur	34.53	86.33

Dosering magnetische kralen: 100 μl; Koppelingssysteem: 1 ml koppelingsbuffer.
Met de toename van de antilichaamconcentratie neemt de hoeveelheid antilichaam gekoppeld aan magnetische kralen toe, terwijl de koppelingsefficiëntie afneemt.

1. Schud het product vóór gebruik grondig om een ​​uniforme suspensie van magnetische kralen te behouden.
2. Centrifugeer, droog of bevries de magnetische kralen niet; dergelijke bewerkingen kunnen kraalaggregatie veroorzaken en de bindingsactiviteit verminderen.
3. NHS-groepen zijn gevoelig voor hydrolyse en gevoelig voor vocht. Sluit de fles onmiddellijk na gebruik goed af, sluit hem af met parafilm en bewaar hem bij -20 °C voor langdurige bewaring.
4. Eiwitstabilisatoren zoals BSA en gelatine kunnen de binding tussen antilichamen en magnetische korrels remmen. Zorg er daarom voor dat het antilichaamopslagsysteem geen primaire aminebevattende eiwitstabilisatoren bevat tijdens antilichaamkoppeling.
5. Stoffen die primaire aminen in de buffer bevatten, zullen de eiwitkoppeling op het kraaloppervlak remmen. Dialyse en ontzouting worden aanbevolen om primaire amineverontreinigingen te verwijderen.