NHS-Magnetperlen

NHS-Magnetkügelchen sind mit N-Hydroxysuccinimid (NHS) modifizierte Mikrokügelchen. Die NHS-Gruppen können mit Aminogruppen enthaltenden Biomolekülen (insbesondere primären Aminen) wie Proteinen, Antikörpern, Enzymen, Polypeptiden und Nukleinsäuren reagieren, um stabile Peptidbindungen zu bilden und eine kovalente Kopplung zu erreichen. Sie werden häufig in der Affinitätsreinigung sowie dem analytischen Nachweis von Antikörpern, Antigenen und anderen Biomolekülen eingesetzt.

1. Einfache Bedienung: Keine Voraktivierung erforderlich; zur direkten kovalenten Kopplung mit biologischen Liganden fähig.
2. Hohe Effizienz: Die Kopplungseffizienz und Bindungskapazität biologischer Liganden ist viel höher als die von Carboxyl-Magnetkügelchen.
3. Schnelle Reaktion: Die Kopplung verschiedener primärer Amine enthaltender biomolekularer Liganden kann innerhalb von 1–2 Stunden abgeschlossen sein.
4. Milde Bedingungen: Die Kopplung kann bei Raumtemperatur oder 4℃ durchgeführt werden, wobei der pH-Bereich für das Reaktionssystem zwischen 4 und 10 liegt.
5. Hohe Stabilität: Bildet stabile Bindungen, um eine Ligandenabspaltung zu verhindern.

Dieses Produkt kann alle primären Amingruppen enthaltenden Substanzen wie Proteine, Antikörper und Nukleinsäuren kovalent koppeln. Es wird häufig bei der Trennung und Reinigung von Proteinen/Antikörpern sowie bei experimentellen Techniken im Zusammenhang mit Immunoassays eingesetzt.

Arbeitsablauf

Kopplungstest des monoklonalen Anti-AFM1-Antikörpers mit NHS-Magnetkügelchen (quantifiziert durch Bradford-Proteinassay)

1. Kopplungstest des monoklonalen AFM1-Antikörpers mit NHS-Magnetkügelchen (bestimmt durch den Bradford Protein Quantification Assay)

   Dosierung des monoklonalen Antikörpers AFM1 (μg)	Kopplungsbetrag (μg)	Kopplungseffizienz (%)
   5.00	4,67	93,40
   10.00	9.54	95,40
   20.00	19.27	96,35
   30.00	27.32	91.07
   40,00	34,53	86,33

Dosierung der Magnetkügelchen: 100 μL; Kopplungssystem: 1 ml Kopplungspuffer.
Mit steigender Antikörperkonzentration steigt die Menge an an Magnetkügelchen gekoppelten Antikörpern, während die Kopplungseffizienz abnimmt.

1. Schütteln Sie das Produkt vor der Verwendung gründlich, um eine gleichmäßige Suspension der Magnetkügelchen zu erhalten.
2. Die Magnetkügelchen nicht zentrifugieren, trocknen oder einfrieren; Solche Vorgänge können zur Perlenaggregation führen und die Bindungsaktivität verringern.
3. NHS-Gruppen neigen zur Hydrolyse und sind feuchtigkeitsempfindlich. Verschließen Sie die Flasche sofort nach Gebrauch fest, verschließen Sie sie mit Parafilm und lagern Sie sie zur Langzeitkonservierung bei -20 °C.
4. Proteinstabilisatoren wie BSA und Gelatine können die Bindung zwischen Antikörpern und Magnetkügelchen hemmen. Stellen Sie daher sicher, dass das Antikörperspeichersystem während der Antikörperkopplung keine primären aminhaltigen Proteinstabilisatoren enthält.
5. Substanzen, die primäre Amine im Puffer enthalten, hemmen die Proteinkopplung an die Perlenoberfläche. Zur Entfernung primärer Aminverunreinigungen werden Dialyse und Entsalzung empfohlen.