Garrafas magnéticas do NHS

As esferas magnéticas NHS são microesferas modificadas com N-Hidroxisuccinimida (NHS). Os grupos NHS podem reagir com biomoléculas contendo aminoácidos (especialmente aminas primárias), tais como proteínas, anticorpos, enzimas, polipéptidos e ácidos nucleicos, para formar ligações peptídicas estáveis ​​e alcançar acoplamento covalente. Eles são amplamente utilizados na purificação por afinidade, bem como na detecção analítica de anticorpos, antígenos e outras biomoléculas.

1. Operação Simples: Não é necessária pré-ativação; capaz de acoplamento covalente direto com ligantes biológicos.
2. Alta eficiência: A eficiência de acoplamento e a capacidade de ligação dos ligantes biológicos são muito maiores do que as das esferas magnéticas de carboxila.
3. Reação rápida: O acoplamento de vários ligantes biomoleculares contendo aminas primárias pode ser concluído em 1–2 horas.
4. Condições leves: O acoplamento pode ser realizado em temperatura ambiente ou 4°C, com uma faixa de pH aplicável de 4~10 para o sistema de reação.
5. Alta estabilidade: Forma ligações estáveis ​​para evitar a eliminação do ligante.

Este produto pode acoplar covalentemente todas as substâncias primárias contendo grupos amina, como proteínas, anticorpos e ácidos nucleicos. É amplamente aplicado na separação e purificação de proteínas/anticorpos, bem como em técnicas experimentais relacionadas a imunoensaios.

Fluxo de Trabalho

Teste de acoplamento de anticorpo monoclonal anti-AFM1 com esferas magnéticas do NHS (quantificado por ensaio de proteína de Bradford)

1. Teste de acoplamento do anticorpo monoclonal AFM1 com esferas magnéticas do NHS (determinado pelo ensaio de quantificação de proteínas de Bradford)

   Dosagem de anticorpo monoclonal AFM1 (μg)	Quantidade de acoplamento (μg)	Eficiência de acoplamento (%)
   5h00	4,67	93,40
   10h00	9,54	95,40
   20h00	19h27	96,35
   30h00	27.32	91.07
   40,00	34,53	86,33

Dosagem de esfera magnética: 100 μL; Sistema de acoplamento: 1 mL de tampão de acoplamento.
Com o aumento da concentração de anticorpos, a quantidade de anticorpos acoplados às esferas magnéticas aumenta, enquanto a eficiência do acoplamento diminui.

1. Antes de usar, agite bem o produto para manter uma suspensão uniforme de esferas magnéticas.
2. Não centrifugue, seque ou congele as esferas magnéticas; tais operações podem causar agregação de esferas e reduzir a atividade de ligação.
3. Os grupos do NHS são propensos à hidrólise e sensíveis à umidade. Tampe bem o frasco imediatamente após o uso, sele com parafilme e guarde a -20 °C para preservação a longo prazo.
4. Estabilizadores de proteínas como BSA e gelatina podem inibir a ligação entre anticorpos e esferas magnéticas. Portanto, certifique-se de que o sistema de armazenamento de anticorpos não contenha estabilizadores proteicos primários contendo aminas durante o acoplamento do anticorpo.
5. Substâncias contendo aminas primárias no tampão inibirão o acoplamento de proteínas na superfície do cordão. A diálise e a dessalinização são recomendadas para remover contaminantes de aminas primárias.