گره های مغناطیسی NHS

دانه های مغناطیسی NHS میکروسفر هایی هستند که با N-Hydroxysuccinimide (NHS) اصلاح شده اند. گروه های NHS می توانند با بیومولکول های حاوی آمینو (به ویژه آمین های اولیه) مانند پروتئین ها، آنتی بادی ها،آنزیم ها، پلی پپتیدها و اسیدهای نوکلئیک، برای تشکیل پیوندهای پپتیدی پایدار و دستیابی به اتصال همجوشی. آنها به طور گسترده ای در تصفیه afinity و همچنین تشخیص تحلیلی آنتی بادی ها استفاده می شوند،آنتی ژن ها و سایر بیومولکول ها.

1. عملیات ساده: نیازی به فعال سازی قبلی نیست؛ قادر به اتصال مستقیم با لیگاندهای بیولوژیکی است.
2. کارایی بالا: کارایی اتصال و ظرفیت اتصال لیگاندهای بیولوژیکی بسیار بالاتر از گره های مغناطیسی کاربوکسیل است.
3. واکنش سریع: جفت گیری لیگاندهای بیومولیکولی مختلف حاوی آمین اولیه می تواند در عرض 1 ٪ 2 ساعت تکمیل شود.
4. شرایط خفیف: اتصال می تواند در دمای اتاق یا 4 °C انجام شود، با محدوده pH قابل استفاده از 4 ~ 10 برای سیستم واکنش.
5. ثبات بالا: پیوند های پایدار را برای جلوگیری از ریختن لیگان تشکیل می دهد.

این محصول می تواند تمام مواد حاوی گروه آمین اولیه مانند پروتئین ها، آنتی بادی ها و اسیدهای نوکلئیک را به صورت کووالنت جفت کند.به طور گسترده ای در جداسازی و تصفیه پروتئین ها / آنتی بادی ها استفاده می شود، و همچنین تکنیک های تجربی مربوط به آزمایش ایمنی.

جریان کار

آزمایش جفت گیری آنتی بادی مونوکلونال ضد AFM1 با گره های مغناطیسی NHS (با آزمایش پروتئین برادفورد محاسبه شده است)

1. آزمایش جفت گیری آنتی بادی مونوکلونال AFM1 با گره های مغناطیسی NHS (به وسیله آزمایش کمیت پروتئین برادفورد تعیین شده است)

   دوز آنتی بادی مونوکلونال AFM1 (μg)	مقدار اتصال (μg)	بهره وری اتصال (٪)
   5.00	4.67	93.40
   10.00	9.54	95.40
   20.00	19.27	96.35
   30.00	27.32	91.07
   40.00	34.53	86.33

دوز دانه های مغناطیسی: 100 μL؛ سیستم اتصال: 1 ml Puffer اتصال.
با افزایش غلظت آنتی بادی، مقدار آنتی بادی متصل به گره های مغناطیسی افزایش می یابد، در حالی که کارایی اتصال کاهش می یابد.

1. قبل از استفاده، محصول را به طور کامل تکان دهید تا تعلیق یکنواخت دانه های مغناطیسی حفظ شود.
2. دانه های مغناطیسی را سانتریفیوژ نکنید، خشک نکنید و یا منجمد نکنید؛ چنین عملیاتی ممکن است منجر به جمع شدن دانه ها و کاهش فعالیت اتصال شود.
3. گروه های NHS مستعد هیدرولیز و حساس به رطوبت هستند. بلافاصله پس از استفاده بطری را محکم بپوشانید، با پارافلیم مهر و موم کنید و برای نگهداری طولانی مدت در -20 درجه سانتیگراد نگهداری کنید.
4. تثبیت کننده های پروتئین مانند BSA و ژلاتین می توانند اتصال بین آنتی بادی ها و دانه های مغناطیسی را مهار کنند.اطمینان حاصل شود که سیستم ذخیره سازی آنتی بادی شامل هیچ استیبالیزه کننده پروتئین حاوی آمین اولیه در طول جفت گیری آنتی بادی نیست..
5. مواد حاوی آمین های اولیه در بافر، اتصال پروتئین به سطح دانه را مهار می کنند. دیالیز و نمک زدایی برای حذف آلاینده های آمین های اولیه توصیه می شود.