Manik Magnetik NHS

Manik-manik magnetik NHS adalah mikrosfer yang dimodifikasi dengan N-Hydroxysuccinimide (NHS). Gugus NHS dapat bereaksi dengan biomolekul yang mengandung amino (terutama amina primer), seperti protein, antibodi, enzim, polipeptida, dan asam nukleat, untuk membentuk ikatan peptida yang stabil dan mencapai penggandengan kovalen. Mereka banyak digunakan dalam pemurnian afinitas serta deteksi analitik antibodi, antigen, dan biomolekul lainnya.

1. Operasi Sederhana: Tidak diperlukan pra-aktivasi; mampu melakukan kopling kovalen langsung dengan ligan biologis.
2. Efisiensi Tinggi: Efisiensi penggandengan dan kapasitas pengikatan ligan biologis jauh lebih tinggi dibandingkan dengan manik magnetik karboksil.
3. Reaksi Cepat: Kopling berbagai ligan biomolekuler yang mengandung amina primer dapat diselesaikan dalam waktu 1-2 jam.
4. Kondisi Ringan: Kopling dapat dilakukan pada suhu kamar atau 4℃, dengan kisaran pH yang berlaku 4~10 untuk sistem reaksi.
5. Stabilitas Tinggi: Membentuk ikatan yang stabil untuk mencegah pelepasan ligan.

Produk ini secara kovalen dapat memasangkan semua zat yang mengandung gugus amina primer seperti protein, antibodi, dan asam nukleat. Ini diterapkan secara luas dalam pemisahan dan pemurnian protein/antibodi, serta teknik eksperimental terkait immunoassay.

Alur Kerja

Uji penggabungan antibodi monoklonal anti-AFM1 dengan manik magnetik NHS (diukur dengan uji protein Bradford)

1. Uji Kopling Antibodi Monoklonal AFM1 dengan Manik Magnetik NHS (Ditentukan oleh Uji Kuantifikasi Protein Bradford)

   Dosis Antibodi Monoklonal AFM1 (μg)	Jumlah Kopling (μg)	Efisiensi Kopling (%)
   5.00	4.67	93.40
   10.00	9.54	95.40
   20.00	19.27	96.35
   30.00	27.32	91.07
   40.00	34.53	86.33

Dosis manik magnetik: 100 μL; Sistem kopling: 1 mL Buffer Kopling.
Dengan meningkatnya konsentrasi antibodi, jumlah antibodi yang digabungkan dengan butiran magnetik meningkat, sementara efisiensi penggandengan menurun.

1. Sebelum digunakan, kocok produk secara menyeluruh untuk menjaga keseragaman suspensi manik-manik magnetik.
2. Jangan melakukan sentrifugasi, mengeringkan atau membekukan manik-manik magnet; operasi tersebut dapat menyebabkan agregasi manik dan mengurangi aktivitas pengikatan.
3. Kelompok NHS rentan terhadap hidrolisis dan sensitif terhadap kelembapan. Tutup botol dengan rapat segera setelah digunakan, tutup dengan parafilm, dan simpan pada suhu -20 °C untuk pengawetan jangka panjang.
4. Penstabil protein seperti BSA dan gelatin dapat menghambat pengikatan antara antibodi dan manik magnetik. Oleh karena itu, pastikan bahwa sistem penyimpanan antibodi tidak mengandung penstabil protein primer yang mengandung amina selama penggandengan antibodi.
5. Zat yang mengandung amina primer dalam buffer akan menghambat penggandengan protein pada permukaan manik. Dialisis dan desalting direkomendasikan untuk menghilangkan kontaminan amina primer.